今天介绍的文章是著名的美国Joslin糖尿病中心年5月10日在国际权威糖尿病杂志《DiabetesCare》（影响因子：15.）上发布了新的成果：通过血浆蛋白质组和血浆代谢组联合应用寻找到糖尿病肾病（DiabeticNephropathy,DN）的循环标志物，希望对于想开展蛋白质组学与代谢组学实验设计和数据分析的老师和同学有所帮助。
来自国际权威杂志DiabetesCare报道：蛋白质组学和代谢组联合应用为糖尿病患者带来福音
关键词：Labelfree定量蛋白质组，代谢组，糖尿病，循环标志物
年，国际著名的美国Joslin糖尿病中心启动了糖尿病研究领域非常著名的研究项目—Joslin“50年奖章”研究（50-YearMedalistStudy，本文简称Medalist研究）项目，本项目招募了上千名有着50年以上糖尿病史的患者进行研究，希望确定是否存在保护因素来预防糖尿病患者严重并发症（如视网膜病变、肾病和心血管疾病）的发生，这些保护因素的发现将为全世界数百万糖尿病患者的治疗带来福音。
年5月10日，Medalist项目两位发起人GeorgeL.King和HillaryA.Keenan的研究团队在国际权威糖尿病杂志《DiabetesCare》（影响因子：15.）上发布了新的成果：通过血浆蛋白质组和血浆代谢组联合应用寻找到糖尿病肾病（DN,DiabeticNephropathy）的循环标志物，现对于该文章的主要研究内容进行解析。
1.临床患者分组研究设计的流程图（如图1所示）
图1FlowchartofStudyDesignandSubsets.
2.利用免疫印迹法研究肾脏组织中葡萄糖代谢酶和TCA循环的关键酶（如图2所示）
作者对1型糖尿病(n=15)、2型糖尿病(n=19)和非糖尿病(n=5)逝者进行遗体解剖，利用免疫印迹法分析了肾小球的葡萄糖代谢关键酶（糖酵解、AR和乙二醛酶）和TCA循环进行了免疫印迹研究，分析结果表明2型糖尿病患者的pkm2表达水平显著低于对照组；与对照组比较，2型和1型糖尿病患者糖酵解（pkm1、tpi1和eno1）、TCA循环（mtco2）、AR和乙二醛酶途径中的其他酶均呈现下降的趋势。
在2型糖尿病患者中，与肾功能保存的患者相比，严重CKD患者的pkm2水平显著降低；同样，pkm1和eno1的水平在严重CKD患者中也显著增加，而glo1则具有提示意义；组织学分级为无至轻度CKD的2型糖尿病患者TPI1和GLO1的表达高于中度至重度CKD患者。
图2Westernblotsofglomeruliofindividualswithandwithoutdiabetes.
3.利用蛋白质组学技术研究血液循环中蛋白的表达趋势（如图3所示）
作者对于Medalist研究队列中的患者（n=）血浆中的种蛋白进行了靶向蛋白质组学分析，比较了患有CKD（CKD+，n=84）组和无CKD（CKD-，n=96）组之间的差异，结果发现与CKD+组相比，CKD-组有种蛋白明显下调和种蛋白显著上调。同时，在这次蛋白质组分析中作者还检测到6种在前期肾小球研究中观察到差异表达的葡萄糖和TCA途径相关酶，pkm2、tpi1、ldhb和pgM1在1型和2型糖尿病患者CKD-组表达显著上调。和作者的预期一致，许多已知的标志物（如胱抑素C、β2-微球蛋白、NGA和TNFRS）均呈现下调趋势。
随后，作者讨论了重点